在潔凈室環(huán)境中，微生物控制至關(guān)重要。受污染的環(huán)境可能導(dǎo)致產(chǎn)品召回，監(jiān)管觀察，罰款甚至消費(fèi)者死亡。為了防止，破壞和監(jiān)視潔凈室中的微生物污染，必須了解潔凈室微生物學(xué)的幾個(gè)方面。這是無塵室微生物學(xué)文章系列的基礎(chǔ)介紹，討論了其中一些方面。第1部分和第2部分介紹了潔凈室微生物學(xué)，討論了指導(dǎo)文件和FDA的觀察結(jié)果，并概述了潔凈室中微生物污染的常見來源。第三部分提供了無塵室禮服程序的概述。后一篇文章將討論環(huán)境監(jiān)測(cè)的概念以及消毒劑功效和正確清潔以及潔凈室檢測(cè)的重要性。

環(huán)境監(jiān)測(cè)

根據(jù)21 CFR 211.113（b）：“公司必須遵循旨在防止聲稱是無菌的藥品受到微生物污染的適當(dāng)書面程序。” 為了控制微生物污染，必須首先了解其來源。使用環(huán)境監(jiān)視，公用事業(yè)監(jiān)視和產(chǎn)品測(cè)試來了解這些來源。為了進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)，對(duì)空氣中的活菌和非活菌顆粒進(jìn)行采樣。此外，還對(duì)人員和表面進(jìn)行了微生物污染取樣。如果回收了微生物，則可以使用它們的識(shí)別來幫助識(shí)別潛在的污染源以及可能需要的任何糾正和預(yù)防措施。

監(jiān)視環(huán)境和設(shè)施的趨勢(shì)有助于確保防止污染的程序有效并且設(shè)施處于受控狀態(tài)。其他好處包括：通過在超限事件發(fā)生之前識(shí)別出關(guān)注的區(qū)域，使設(shè)施變得積極主動(dòng)；幫助建立相關(guān)的警報(bào)級(jí)別；幫助建立設(shè)施的主要微生物和居民區(qū)系清單；以及提供歷史數(shù)據(jù)從而可以檢測(cè)到數(shù)據(jù)異常。

重要的是要清楚定義“趨勢(shì)”的外觀。該定義應(yīng)包括在程序中，以在整個(gè)機(jī)構(gòu)內(nèi)和一段時(shí)間內(nèi)提供一致的解釋。通常，趨勢(shì)被理解為是歷史數(shù)據(jù)的偏離或特定方向的偏離。1個(gè)警報(bào)級(jí)別應(yīng)用作流程偏離其已建立控制狀態(tài)的預(yù)警系統(tǒng)。在沒有正當(dāng)理由的情況下使用50％的行動(dòng)水平在科學(xué)上是不合理的，在監(jiān)管審核中可能會(huì)被反對(duì)?？梢詫?duì)趨勢(shì)數(shù)據(jù)執(zhí)行統(tǒng)計(jì)分析，以基于設(shè)施的過程能力建立警報(bào)極限。例如，可以利用歷史數(shù)據(jù)并建立95％的置信區(qū)間，其中95％的采樣將被預(yù)期在建議的警報(bào)范圍內(nèi)。

大多數(shù)預(yù)期行動(dòng)級(jí)別已在多個(gè)監(jiān)管文件中確定。如果監(jiān)管機(jī)構(gòu)未規(guī)定行動(dòng)限值，例如，穿著工作服的人員（戴手套的人除外），則風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和統(tǒng)計(jì)分析可為建立行動(dòng)限值提供依據(jù)。

污染恢復(fù)率在USP <1116>中進(jìn)行了描述。它是用于趨勢(shì)分析結(jié)果的有用工具，該結(jié)果通常包含零菌落形成單位（CFU），例如在無菌過程環(huán)境監(jiān)測(cè)中。USP <1116>指出：“由于微生物采樣方法的固有變異性，與著眼于從給定樣品中回收的菌落數(shù)量相比，污染物的回收率是趨勢(shì)結(jié)果更有用的度量。” 2污染回收率的計(jì)算方法是：將含有任何種類生長(zhǎng)物的培養(yǎng)皿總數(shù)除以培養(yǎng)皿總數(shù)乘以100，得出一個(gè)百分比。USP <1116>還提供了有關(guān)無菌環(huán)境中建議的初始污染回收率的表格。

消毒功效和正確清潔的重要性

控制污染物進(jìn)入潔凈室是整個(gè)清潔和消毒過程中關(guān)鍵的問題。3轉(zhuǎn)移到清潔區(qū)域的組件，人員，推車，儲(chǔ)罐，工具和儀器的清潔度至關(guān)重要。如果未對(duì)這些物品進(jìn)行適當(dāng)?shù)南净蚯鍧?，或人員的穿著不當(dāng)，則微生物很容易被運(yùn)送到潔凈室。提供了討論消毒劑功效測(cè)試的多個(gè)指導(dǎo)文件和文章。兩個(gè)非常好的來源包括USP <1072>和PDA技術(shù)報(bào)告70。

必須先清潔物品，然后才能進(jìn)行消毒或滅菌。清潔是從物體上清除異物的過程，并且消毒劑必須按預(yù)期工作。未清除的異物可能會(huì)阻止消毒劑與表面的微生物接觸。異物也可能與消毒劑產(chǎn)生負(fù)面反應(yīng)并使它們失活。

難以清潔的區(qū)域受21 CFR 211.42約束。該法規(guī)要求光滑，堅(jiān)硬的表面易于清潔。多孔表面會(huì)藏有微生物，使其難以回收用于環(huán)境監(jiān)測(cè)。多孔表面還會(huì)使清潔和消毒過程中的微生物難以破壞。3難以觸及的表面可能會(huì)導(dǎo)致無法正確清潔的危險(xiǎn)。

匆忙進(jìn)行清潔，草率清潔或處理不當(dāng)是危險(xiǎn)的做法。更糟糕的是*跳過清潔過程。留下的污垢，油污，指紋和消毒劑殘留物會(huì)為微生物創(chuàng)造好客的棲息地，甚至保護(hù)潛在的微生物免受消毒劑的侵害。3遵循SOP并正確清潔以清除污物源是非常重要的，即使肉眼看不到它們也是如此。這將有助于確保消毒劑可以正常工作。

在消毒劑功效研究期間確定適當(dāng)?shù)南緞舛?。如果沒有正確準(zhǔn)備，處理或使用消毒劑，則破壞微生物的效果可能會(huì)受到影響。3這可能導(dǎo)致微生物的生存。如果不正確使用和使用消毒劑，其有效性可能會(huì)受到影響。例如，縮短已建立的消毒劑接觸時(shí)間可以導(dǎo)致微生物存活。3即使正確配制并經(jīng)常更換消毒劑溶液，骯臟的設(shè)備（例如拖把頭或水桶）也會(huì)影響消毒劑的有效性并導(dǎo)致微生物存活。3污染物可能會(huì)在不知不覺中散布到整個(gè)設(shè)施中。確保清潔設(shè)備的清潔和正確維護(hù)也很重要。

消毒劑必須符合在設(shè)施中使用的資格。在對(duì)消毒劑進(jìn)行鑒定時(shí)，測(cè)試應(yīng)包括工廠中發(fā)現(xiàn)的各種表面，這些表面代表壞的孔隙率和難清潔的表面。如果可能，選擇用于研究的微生物應(yīng)包括從設(shè)施中分離出來的環(huán)境。在研究過程中，還將確定建議的聯(lián)系時(shí)間。術(shù)語(yǔ)“接觸時(shí)間”是指消毒劑保持濕潤(rùn)并與被消毒表面接觸的時(shí)間。

應(yīng)該在整個(gè)使用期間評(píng)估消毒劑的性能，以確定使用到期日。PDA技術(shù)報(bào)告70建議使用接近或稍微超過研究有效期的消毒劑。重要的是要注意，在使用A / B級(jí)之前，應(yīng)對(duì)消毒劑進(jìn)行無菌過濾或消毒，以防止消毒劑成為可擴(kuò)散到整個(gè)潔凈室的污染源。

消毒功效測(cè)試和消毒程??序通常是監(jiān)管審核中的熱門話題。為使流程順利進(jìn)行，請(qǐng)做好準(zhǔn)備，并以干凈的報(bào)告形式將所有數(shù)據(jù)匯總并整齊地組織起來。

結(jié)論

潔凈室微生物學(xué)涉及許多學(xué)科。可以參考潔凈室微生物學(xué)概念的多種指導(dǎo)文件和法規(guī)。為避免潛在的監(jiān)管發(fā)現(xiàn)，請(qǐng)積極主動(dòng)并在線發(fā)布研究警告信，并盡快糾正任何指出的程序空白。

為了控制微生物污染，必須控制無塵室中發(fā)生的所有活動(dòng)，包括過程，程序，人員，原材料，賦形劑，組件，API，設(shè)施，設(shè)備，機(jī)器，環(huán)境，表面，空氣供應(yīng)，公用事業(yè)，水來源，材料轉(zhuǎn)移，相鄰區(qū)域以及消毒和清潔方案。員工每次處理無菌產(chǎn)品時(shí)，必須遵循程序，使用適當(dāng)?shù)臒o菌技術(shù)，注意細(xì)節(jié)并格外小心。消費(fèi)者的生活可能取決于員工的行為，其品行，正確控制的潔凈室以及潔凈室微生物學(xué)原理。